细胞凋亡实验步骤及注意事项

一、实验目的1、掌屋凋亡细胞的形态特征2、学会用荧光探针对细胞进行双标记来检测正常活细胞、凋亡细胞和坏死细胞的方法二、实验原理细胞死亡根据其性质、起源及生物学意义区分为凋亡和坏死两种不同类型。凋亡普遍存在于生命界，在生物个体和生存中起着非常重要的作用。它是细胞在一定生理条件下一系列顺序发生事件的组合，是细胞遵循一定规律自己结束生命的自主控制过程。细胞凋亡具有可鉴别的形态学和生物化学特征。在形态上可见凋亡细胞与周围细胞脱离接触，细胞变园，细胞膜向内皱缩、胞浆浓缩、内质网扩张、细...

查看更多

科研实验常用人肝癌细胞株的区别

肝细胞癌（hepatocellularcarcinoma，HCC）是近年来发病率急剧上升的恶性肿瘤之一。肝癌细胞系广泛应用于各类肝癌的研究。肝癌细胞系的基因组与健康人细胞系的基因组不同。常见的人肝癌细胞系有PLC、Huh7、Huh7.5、Hep3B、HepG2、SMMC-7721、MHCC97-H、MHCC9-L等，每一种细胞系都有自己的特点，但是，SMMC-7721,、MHCC9-L已经退出实验舞台，由于它们具有与原代肝癌细胞相似的生物学特性，无生物学改变、特性稳定、无限制...

查看更多

慢病毒包装常见问题汇总

Q:什么是MOI？A:在微生物学中，MOI是病原体(如噬菌体或病毒、细菌等)与感染目标(如细胞)的比率。对于病毒，MOI是病毒颗粒数量与特定空间中存在的目标细胞数量的比率。通常可将某株细胞有80%被感染时所用的病毒颗粒数和细胞数目的比值作为该株细胞的MOI。Q：如何稀释病毒？A：您可使用完培、PBS液等将病毒稀释到需要的滴度。如将滴度为5x109TU/ml的病毒稀释到1x109TU/ml，则需取20µl病毒液加入到80µl的完培中。Q：用于病毒感染的细...

查看更多

慢病毒包装步骤

1.重组慢病毒的制备Day1:汇合度90%的10cmdishsHEK293T细胞（~6×107/dish）按1：1比例传代至15cmdishs，第二天细胞汇合度达到90%-95%（~1.5×108/dish），培养基为Gibico高糖DMEM培养基（含10%FBS）。Day2:转染前2-3个小时更换培养基（含10%FBS)；2)按照以下比例配制转染试剂：Mix1体积μlMix2量DMEM（无FBS）1000μlDMEM（无FBS）1000μl目的基因质粒25μgVGF190μ...

查看更多

病毒实验原理和慢病毒包装系统介绍

慢病毒是一种有包膜的RNA病毒，直径为80-120nm，呈二十面体对称结构、球形。病毒颗粒最外层是包膜(包膜蛋白决定了感染细胞的类型)，再往里依次为基质蛋白和衣壳，最里面是两条相同的正股RNA链和酶(逆转录酶、整合酶和蛋白酶)。慢病毒实验原理慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种，基因组为双链RNA。但区别于一般的逆转录病毒，慢病毒具有更广的宿主范围，对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。重组慢病毒载体是以HIV-1（人类免疫缺陷I型病毒）为基础发展起来的工具载体，...

查看更多