CRISPR/Cas9 基因编辑和NGS验证

CRISPR/Cas9基因编辑技术需要通过下一代测序(NGS)来验证，能够在核苷酸水平分辨率下进行大规模评估基因编辑的准确性和可靠性。高效、可自动化和可扩展的CIRCLE-seq是一种体外NGS测定，可以对CRISPR介导的切割进行灵敏的脱靶检测。CRISPR/Cas9基因编辑技术CRISPR代表成簇规律间隔的短回文重复序列。这些重复的DNA片段最初来源于病毒病原体，并作为模板将CRISPR相关蛋白9(Cas9)核酸内切酶引导至新入侵的病毒。当Cas9遇到同源病毒序列时，它会...

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HE染色实验中常见问题及应对措施

HE染色实验常见问题及解决方案HE染色是石蜡切片技术中常用的染色方法之一，简称为苏木精-伊红染色法。该方法使用碱性的苏木精染液将细胞核内的染色质和胞质内的核酸染成紫蓝色，同时使用酸性染料伊红将细胞质和细胞外基质中的成分染成红色。1、切片出现白色斑点原因：(1)烘片温度过低，导致玻片未干透；(2)切片在二甲苯中停留时间过短；(3)二甲苯使用时间过长，导致脱蜡不效果不好。对策：若玻片未干透，先用无水乙醇去除水分，再重新脱蜡。若斑点是由于停留时间过短或使用时间过长造成的，则需重新操...

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稳定细胞株的筛选步骤

稳定细胞株是一种常用于基因表达、药物筛选和蛋白质表达等领域的工具。但是，稳定细胞株的筛选需要经过一系列的步骤和实验，下面介绍一下稳定细胞株筛选的两种方法和稳定细胞株的筛选简要步骤：一、质粒转染法先把质粒整合到染色体上后，用相应的质粒DNA中的抗性标志来筛选该细胞系，单克隆筛选稳定细胞株。1、筛选浓度测定，以10~14天细胞全部死亡的抗生素浓度为筛选浓度；2、进行细胞接种，转染实验前天接种细胞，各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞密度应达到60...

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紫外可见分光光度计操作标准SOP

紫外可见分光光度计操作维护标准SOP1.0适用范围：本规程适用于制药行业质量控制实验室安装的紫外可见分光光度计操作维护和清洁标准2.0职责：QC员：负责仪器的操作和维护。QC负责人/经理：负责仪器操作标准程序的问责制和有效实施。3.0定义-分光光度计：测量样品在固定波长或较宽波长扫描范围内的吸光度，并在单色光束通过样品时产生光谱的装置。4.0紫外可见分光光度计操作步骤：4.1操作前确保仪器清洁并校准。打开仪器和与仪器连接的计算机的主电源。4.3接通电源后，分光光度计开始初始化...

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塑料离心管和玻璃离心管选购指南

市场上常见离心管主要分为两种：即：塑料离心管和玻璃离心管，也有少数是钢制离心管。那么这些不同材质的离心管有什么区别呢?下面小编就来介绍一下塑料离心管和玻璃离心管的区别。玻璃离心管玻璃离心管是由玻璃制成的，不同厂家可能使用的玻璃成分不同，所以强度上可能会略有差异。我们的普通玻璃试管可以承受的相对离心力(RCF)通常小于3000g，而硼硅玻璃管一般可以承受超过10000g以上的相对离心力。但由于玻璃离心管质量易碎，所以玻璃管一般不用于高速离心机，用得也不多。由于玻璃本身的特性，它...

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