荧光定量pcr常见问题的可能原因与解决方案

荧光定量pcr常见问题的可能原因与解决方案无Ct值或Ct值延迟出现:扩增曲线信号不佳，曲线不平滑:标准曲线线性差。1.扩增产物大小不合适：实时荧光定量PCR扩增片段的长度通常在80-150bp之间，如果调整反应的时间有可能扩增500bp的片段。2.PCR反应过程中退火及延伸的时间过短或过长：应根据扩增片段的大小予与调整。3.MgCl,浓度不合适：按0.5mm的间距调整MgCI2的浓度。4.循环数设置不足：最少设置35个循环，可以增加到45个循环。超过45个循环以上背景信号会增...

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消毒和灭菌的区别

微生物行业及微生物实验室经常会用到消毒、灭菌和清洁那么清洁、消毒和灭菌的区别是什么呢？灭菌灭菌的定义是破坏或消除所有形式的微生物生命的过程，并通过物理或化学方法在设施中进行。加压蒸汽、干热、EtO气体、过氧化氢气体等离子体和液体化学品是医学环境设施中使用的主要消毒剂。其实灭菌和消毒是有区别的，一些卫生专业人员以及技术和商业文献将“消毒”称为“灭菌”，将物品称为“部分无菌”。当化学品被用来破坏所有形式的微生物生命时，它们可以被称为化学消毒剂。这些用于较短暴露时间的相同杀菌剂也可...

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季铵盐类消毒剂是什么

季铵盐类消毒剂是什么？季铵化合物广泛用作消毒剂。季铵盐是较好的清洁剂，但高硬度的水和棉和纱布垫等材料会使它们的杀菌性降低，因为不溶性沉淀物或棉布和纱布垫分别吸收了活性成分。季铵化合物与其他几种消毒剂（例如酚类物质、碘伏）一样，革兰氏阴性菌可以在其中存活或生长。季铵化合物消毒剂的化学性质在化学上，季铵盐是有机取代的铵化合物，其中氮原子的化合价为5，其中四个取代基(R1-R4)是给定大小或链长的烷基或杂环基，第五个(X-)是卤化物、硫酸盐或类似的自由基.每种化合物都表现出自己的抗...

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过氧化氢消毒液的应用

过氧化氢消毒液的消毒原理：过氧化氢的作用是产生破坏性的羟基自由基，这些自由基可以攻击膜脂、DNA和其他基本细胞成分。由具有细胞色素系统的需氧生物和兼性厌氧菌产生的过氧化氢酶可以通过将过氧化氢降解为水和氧气来保护细胞免受代谢产生的过氧化氢的影响。过氧化氢消毒液的灭菌活性：过氧化氢对多种微生物具有活性，包括细菌、酵母菌、真菌、病毒和孢子。0.5%的加速过氧化氢在1分钟内表现出杀菌和杀病毒活性，在5分钟内表现出杀分枝杆菌和杀真菌活性。尿液中过氧化氢的杀菌效果和稳定性已被证明可对抗多...

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细胞传代的步骤-贴壁细胞传代培养步骤

传代培养是细胞培养常规保种方法之一，也是几乎所有细胞生物学实验的基础。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释，分种成多瓶，细胞才能继续生长。这一过程就叫传代。传代培养可获得大量细胞供实验所需。传代要在严格的无菌条件下进行，每一步都需要认真仔细的无菌操作。悬浮型细胞直接分瓶就可以，而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。本实验以传代大鼠骨髓充间质干细胞为例进行细胞传代的步骤做一介绍。一、传代前准备实验开始前，将无菌培养瓶、15ml离心管、移液管、枪头等放入无菌超净工作台，紫外线照射30mi...

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