免疫荧光标记法

免疫荧光标记法1、细胞膜上的免疫荧光检测法间接标记法1)制备单细胞悬液；2)细胞计数，取出1×106个细胞于试管中；3)用台盼蓝染色计活细胞数，要求活细胞数90～95%；4)在试管中加入一抗，（剂量按照说明书的要求），孵育30～60分钟；5)PBS洗涤1～2次，1500rpm，离心3分钟，弃上清；6)加入二抗，孵育20～30分钟；7)PBS洗一次，1500rpm，离心3分钟，弃上清;8)加300μlPBS，上机检测(若不能及时上机检测，可加1ml1%多聚甲醛固定，可放置1周)...

查看更多

细胞凋亡检测及分子生物学检测步骤

细胞凋亡检测及分子生物学检测步骤：1、细胞DNA含量分布（由细胞DNA降解方式检测细胞凋亡）收集已固定的单细胞悬液约5×105~1×106/ml；离心除去固定液，3mlPBS重悬细胞;使用低速离心机1500rpm离心，5分钟，弃去PBS；加PI染液1ml，室温避光20分钟；调整细胞浓度5×105/ml；上机检测。2、磷脂酰丝氨酸外翻分析检测细胞凋亡1)常规制备单细胞悬液,用PBS洗两次.(若为全血要先溶血),取约5×106个细胞，1500rpm离心,弃上清,用400μl1×B...

查看更多

琼脂糖核酸电泳介绍

琼脂糖核酸电泳步骤1.用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净，放在制胶平板上，封闭模具边缘，架好梳子；2.根据欲分离DNA片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶：准确称量琼脂糖干粉，加入到配胶用的三角烧瓶内，定量加入电泳缓冲液（一般20~30ml）；3.放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻，加入一滴荧光染料，轻轻旋转以充分混匀凝胶溶液，倒入电泳槽中，待其凝固；4.室温下30~45分钟后凝胶全凝结，小心拔出梳子，将凝胶安放在电泳槽内；5.向电泳槽中倒入电泳缓冲液，其量以没过胶面1m...

查看更多

细胞培养板孔径对细胞生长的影响

细胞培养是细胞生物学和分子生物学实验中的重要环节。而细胞培养板是细胞培养中常用的容器，它的孔径大小对于细胞的生长和实验结果有一定的影响。本文将从细胞培养板孔径大小对细胞生长、细胞通气和细胞迁移的影响进行介绍。一、细胞培养板孔径大小对细胞生长的影响细胞培养板的孔径大小对细胞的生长是有影响的。孔径较小的细胞培养板通常具有较高的背景阻抗，对细胞形态和分子表达的影响较小，比如Tanswell细胞小室适合于长时间培养或实验。而孔径较大的细胞培养板则通常具有较低的背景阻抗，对细胞形态和分...

查看更多

浅谈检测葡萄糖乳酸的工具-EKF乳酸分析仪

乳酸是葡萄糖无氧代谢的产物，广泛分布于人体的白色骨骼肌、脑、皮肤、肾脏髓质和红细胞中。乳酸的产生主要通过葡萄糖糖酵解途径，在细胞质中通过丙酮酸代谢产生。血液乳酸浓度被视为反映外周组织灌注情况和细胞内是否缺氧的敏感标志物，也是作为濒亡预兆的指标。使用EKF乳酸分析仪通过对乳酸浓度的实时检测，也可以及时发现并纠正变化。乳酸的动态变化与机体的内环境密切相关，因此动态检测乳酸浓度对于医生在抢救过程中及早发现疾病变化具有重要意义。通过检测乳酸值，医生能够判断细胞的损伤程度和组织的缺氧状...

查看更多