DNA克隆技术概述

当您听到“克隆”一词时，您可能会想到克隆整个生物体，例如绵羊多利。然而，克隆某物的全部意思就是制作它的基因精确副本。在分子生物学实验室中，常被克隆的是基因或其他小片段DNA称为DNA克隆。DNA克隆技术概述DNA克隆技术其实就是基因编辑，是指制作特定DNA片段的多个相同副本的过程。在典型的DNA克隆过程中，通常会将目的的基因或其他DNA片段插入称为质粒的环状DNA片段中。插入是使用“剪切和粘贴”DNA的酶完成的，它会产生一个重组DNA分子，或由多个来源的片段组装而成的DNA。...

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实验室仪器可以自校准吗？

实验室移液枪、实验室天平、PH计等实验室仪器使用一段时间后，需要对其进行校准，那么实验室仪器可以自校准吗？小编带你了解一下：内部校准与自校准的区别“自校准”一般是利用测量设备自带的校准程序或功能（比如智能仪器的开机自校准程序）或设备厂商提供的没有溯源证书的标准样品进行的校准活动，通常情况下，其不是有效的量值溯源活动，但特殊领域另有规定除外。“内部校准”是指在实验室或其所在组织内部实施的，使用自有的设施和测量标准，校准结果仅用于内部需要，为实现获认可的检测活动相关的测量设备的量...

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DNA重组实验技术总结

DNA重组技术，是分子的生物学研究生需要掌握的实验技术之一，DNA重组实验方法总结如下：一、实验目的体外连接获得重组分子，用于转化受体细胞。二、实验原理DNA重组技术是用内切酶分别将载体和外源DNA切开，经分离纯化后，用连接酶将其连接，构成新的DNA分子。外源DNA片段和质粒载体的连接反应策略有以下几种：1、带有非互补突出端的片段用两种不同的限制性内切酶进行消化可以产生带有非互补的粘性末端，这也是最容易克隆的DNA片段，一般情况下，常用质粒载体均带有多个不同限制酶的识别序列组...

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PCR仪使用参数设定注意事项

PCR仪使用参数设定注意事项PCR仪使用参数设定不正确会影响到PCR实验结果，这主要表现在温度、时间和循环次数上，如果温度参数设置过高，延伸时间不够都会对实验结果造成影响，下面谈谈使用PCR仪参数设定时的注意事项：一、温度和时间温度与时间的设置：基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法，双链DNA在90～95℃变性，再迅速冷却至40～60℃，引物退火并结合到靶序列上，然后快速升温至70～75℃，在TaqDNA聚合酶的作用下，使引物链沿模...

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一种通过改造CHO 细胞提升抗体产量的新技术

丙酮酸羧化酶是细胞质和线粒体代谢途径的重要元素，可以有效促进能量代谢。在CHO细胞中过表达酵母胞质丙酮酸羧化酶(PYC2)，可以增加丙酮酸流向TCA循环。增强的PYC2表达导致丙酮酸通量增加，从而使乳酸积累减少多达4倍，并显着增加细胞密度和培养寿命。有了这个结果，与亲本细胞相比，工程细胞的抗体表达显着提高了70%，产品质量也有所提高（约3倍）。通过PYC2工程改造提升细胞性能，在丙酮酸、葡萄糖、乳酸和细胞能量代谢方面具有均高于亲代细胞的各种优势。PYC2工程改造原理和方法在补...

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